Estudio estructural de union de tla-1 s70g con sulbactam

RESUMEN La resistencia bacteriana a antibióticos es un problema a nivel mundial. En el 2017 la organización mundial de la salud, OMS, reportó una lista de microorganismos resistentes a antibióticos a los cuales se les debe de dar prioridad a la investigación, siendo que todos los microorganismos del grupo de prioridad critica son resistentes a antibióticos β-lactámicos. El principal mecanismo de resistencia por parte de las bacterias es la producción de β-lactamasas, enzimas que hidrolizan a los antibióticos β-lactámicos. En el 2000 Silva y colaboradores caracterizaron a una β-lactamasa de espectro extendido (BLEE) endémica de México, llamada TLA-1, la cual, pertenece a la clase A y a la subclase A2 de las β-lactamasas, subclase poco estudiada y cuya relevancia ha incrementado en los últimos años. En este trabajo se determinó la estructura de la mutante TLA-1 S70G sola y en complejo con sulbactam, en continuación a estudios previos de nuestro laboratorio donde se determinó la estructura cristalográfica de la BLEE TLA-1 en forma silvestre y en complejo con el inhibidor ácido clavulánico, donde se observó algo que no había sido reportado antes, dos diferentes intermediarios de ácido clavulánico unidos covalentemente a dos serinas la 70 y la 237. En este trabajo se encontró al intermediario trans-enamina del sulbactam en el sitio activo formando dos puentes de hidrogeno con los residuos Thr 235 y Gly 217, no se encontró formando una unión covalente con la Ser 237, la cual tiene un 40% de conservación en β- lactamasas de la subclase A2, lo que deja en duda cual residuo hidrolizó al sulbactam, siendo también una posible candidata a ser la segunda serina catalítica de TLA-1, la Ser 130. Si bien, se necesitan realizar más estudios para concluir cual serina tiene actividad catalítica en la mutante de TLA-1 S70G, este trabajo en conjunto con la tesis de Cifuentes et al., 2019, demuestran que TLA-1 es la primer BLEE con dos serinas catalíticas, lo cual tendrá importantes implicaciones en el futuro desarrollo de inhibidores de BLEE.