Evaluación de las señales a través de TLR5 en la activación de células T CD4+ de neonatos y adultos humanos in vitro y en un modelo de vacunación neonatal por rotavirus in vivo

ROSARIO GUADALUPE LABASTIDA CONDE

Resumen Los neonatos son muy susceptibles a infecciones por patógenos intracelulares. Esto se debe a que presentan una escasa producción de citocinas Th1 (IL-12, IFN-g), responsables de la eliminación de células infectadas por patógenos intracelulares. La respuesta prevalente de los neonatos está sesgada hacia Th2 (IL-4, IL-5 e IL-13) o inmunidad de barrera. Cabe recordar que las respuestas Th1 y Th2 son antagonistas entre sí. Se considera que la respuesta eficiente de los linfocitos T neonatales puede lograrse, pero con un umbral de activación mucho más alto que el de las células de adulto. La respuesta inmune depende del reconocimiento de un antígeno extraño y de señales de alarma inmunológica. Los linfocitos T CD4+ coordinan la respuesta inmune adaptativa y se activan por el contacto con las células dendríticas activadas, que les presentan el antígeno y señales co-estimulatorias. Estas últimas se expresan durante la activación de las células dendríticas, por la detección de moléculas firma de patógenos o de daño celular (PAMPs y DAMPs por sus siglas en inglés). Los linfocitos T también expresan algunos receptores de PAMPs, como los TLRs. En este trabajo evaluamos el papel de la flagelina, monómero del flagelo de las bacterias, en la respuesta inmune de los linfocitos T CD4+ de neonatos y adultos in vitro y en un modelo de vacunación neonatal de rotavirus in vivo. Encontramos que la flagelina indujo la expresión de IFN-γ, IL-1β e IL-12 en células mononucleares de neonatos y adultos humanos. Cuando las células T CD4+ vírgenes humanas se activaron en presencia de flagelina, hubo un alto nivel de expresión de IFNγ y su receptor, tanto en neonatos como en adultos. Además, la flagelina indujo una activación Th1 en células de memoria en adultos. Para probar la capacidad adyuvante de la flagelina in vivo, utilizamos un modelo de vacunación neonatal murino para la infección con rotavirus, un patógeno responsable de la diarrea severa en los bebés. Hicimos la evaluación usando al antígeno VP6, que está conservado entre distintas cepas de rotavirus, y a la flagelina como adyuvante. Para favorecer la presentación del antígeno y una baja dosis de antígeno, utilizamos como plataforma de vacunas a las nanopartículas de oro (AuNPs) acopladas a VP6 (Proteína de la capa intermedia de rotavirus) y/o flagelina, ya que se ha demostrado que las AuNPs potencian la repuesta inmunológica y favorecen el direccionamiento del antígeno. También hicimos la evaluación con VP6 y flagelina libres.

Tipo de documento: Tesis de doctorado

Formato: Adobe PDF

Audiencia: Investigadores

Idioma: Español

Área de conocimiento: INGENIERÍA Y TECNOLOGÍA

Campo disciplinar: CIENCIAS TECNOLÓGICAS

Nivel de acceso: Acceso Abierto