Evaluación del daño genético y la inestabilidad en el desarrollo del cráneo en la especie centinela peromyscus melanophrys que habita en zonas mineras.

En el estado de Morelos la explotación de minería metálica se concentró en el municipio de Tlaquiltenango, específicamente en la localidad de Huautla. Dicha actividad dio como resultado la acumulación de 780, 000 toneladas de residuos mineros ricos en Pb, Mn y Cd que no han sido tratados y que representan un foco de contaminación permanente para la biota al encontrarse biodisponibles, debido a que los metales pesados (MP), son genotóxicos, altamente tóxicos a bajas concentraciones, no biodegradables, bioacumulables y además pueden biomagnificarse a través de la cadena trófica. Debido a que los metales pesados se encuentran biodisponibles en los jales de Huautla, Morelos, se espera que los roedores de la especie Peromyscus melanophrys que viven en los jales presenten mayor daño genético en comparación con los individuos del sitio control. Asimismo, se espera que los individuos expuestos a altas concentraciones de metales pesados exhiban inestabilidad en el desarrollo del cráneo en comparación con los controles. Cuando los organismos se encuentran sometidos a contaminantes generan respuestas que pueden ser detectadas a través del uso de biomarcadores. Es por ello, que con el fin de evaluar el daño genético en hígado y la inestabilidad en el desarrollo del cráneo de la especie centinela Peromyscus melanophrys se recurrió al uso de dos biomarcadores de efecto temprano, microsatélites y fluctuación asimétrica respectivamente. La metodología para daño genético consistió en realizar la captura de cuarenta individuos de la especie Peromyscus melanophrys utilizando 132 trampas Sherman cebadas con una mezcla de cacahuate, avena y vainilla, después los roedores fueron sacrificados utilizando una cámara letal, a continuación se llevó a cabo la extracción del ADN del hígado con un kit y posteriormente la amplificación de ocho microsatélites marcados con un fluorocromo distinto, los microsatélites que presentaron: 1) bandas claras, 2) polimorfismo y 3) amplificación de la mayoría de los individuos fueron mandados al secuenciador del laboratorio de Biología Molecular del Instituto de Biología (UNAM). Los datos proporcionados por el instituto fueron analizados con el programa 2 GeneMarker V2.7.0. para conocer el número de pares de bases de cada microsatélite. Por otra parte, para estimar la inestabilidad en el desarrollo del cráneo, los cuarenta cadáveres fueron colocados en una caja que contenía larvas y adultos del escarabajos la especie Dermestes maculatus (Coleoptera: Dermestidae) para que remover el tejido de los huesos. Al concluir este proceso se procedió a tomar de fotografías de cada uno de los cráneos en vista ventral con ayuda del equipo Photosimile 360 que tiene integrada a una cámara EOS T5I marca Canon, a continuación, se hizo la digitalización de las fotos tpsDig y los datos fueron analizados en SAGE (Fluctuating assymetry analysis with geometric morphometrics). Los resultados obtenidos con la prueba de T para el daño genético muestran que los individuos del grupo expuesto presentaron mayor inestabilidad en el microsatélite (incremento de mutaciones puntuales) en comparación con el grupo testigo. Asimismo, el análisis de regresión lineal mostro una relación significativa, en la cual, a mayor concentración del metal, mayor es el daño genético observado. Esto puede deberse a la genotoxicidad que los metales pesados producen a través de la generación de ROS o interfiriendo con el funcionamiento de las metalotioneínas y los sistemas de reparación al ADN lo cual se refleja en la inestabilidad del microsatélite. Por otra parte, el análisis multivariado de varianza muestra que los individuos expuestos presentaron mayor fluctuación asimétrica en el cráneo en comparación con los individuos testigo. Lo cual posiblemente se encuentra relacionado con la disrupción que ejercen los metales pesados en la estabilidad del desarrollo del cráneo. Este estudio concluye que ambos biomarcadores (microsatélites y fluctuación asimétrica) son útiles para evaluar el daño genético y la inestabilidad en el desarrollo del cráneo, respectivamente, en una la especie centinela Peromyscus melanophrys que se encuentra crónicamente expuesta a una mezcla de MP.