Mapeo de distribución de receptores de speract en espermatozoides de erizo de mar con péptidos marcados

Speract es un decapéptido de secuencia consenso GFDLNGGGVG liberado por la capa de gelatina de los huevos de erizos de mar, que funciona como quimioatrayente del espermatozoide e inicia una cascada de señalización que genera cambios en el espermatozoide como aumentos en [Ca]i, pHi y cGMP, que conllevan a la reorientación del nado del espermatozoide. Para realizar todos estas alteraciones en la fisiología del espermatozoide, speract debe unirse a su receptor, una glicoproteína membranal de 77kD ubicada en el flagelo. Hasta la fecha sabemos que este receptor contiene dominios extracelulares con presencia abundante de cisteínas, y que su localización se confina a micro dominios lipídicos formando agrupaciones, sin embargo, no existen imágenes de microscopia que corroboren la formación de estas agrupaciones, debido a que el tamaño de los receptores se encuentra por debajo del límite de difracción de la luz. En esta investigación buscamos la generación de imágenes de súper resolución que confirmen la formación de estos agrupaciones en la membrana del espermatozoide de erizo de mar utilizando un speract sintético que denominamos G-speract (GGSGGGFDLNGGGVG) unido a colorantes fluorescentes