Importancia de la deleción del sRNA RyhB en Escherichia coli enteropatogénica E2348/69

El gen ryhB codifica para un RNA pequeño que regula la expresión post-transcripcional de mRNAs durante la escasez de hierro en bacterias. A través de la expresión de RyhB, los mRNAs pueden ser degradados o estabilizados para inhibir o permitir su traducción, respectivamente. De esta forma ryhB modera los niveles de hierro y su aprovechamiento en la célula, en un proceso conocido como homeostasis de hierro. En un análisis transcripcional previo, en la cepa E2348/69 expuesta a NaHCO3, el cual tuvo un efecto negativo sobre su crecimiento, se observó un mayor nivel transcripcional de ryhB, lo cual sugirió su posible participación en el mecanismo de acción del NaHCO3 y una probable relación con la homeostasis de hierro. El objetivo del presente trabajo se focalizó en explorar el efecto de la deleción del gene ryhB en la respuesta a NaHCO3 en las cepas E2348/69 y K-12 MG1655 de Escherichia coli. Inesperadamente, la mutación de ryhB en E2348/69, pero no en K-12 MG1655, impidió su crecimiento en medio mínimo aún suplementado con hierro. Este resultado sugiere que ryhB es más importante para la cepa E2348/69 que para la K-12 MG1655 bajo la condición de limitación de nutrientes. Aún en medio nutritivo, la mutante carente de ryhB E2348/69 experimentó un retraso en el crecimiento, con una fase lag más prolongada, en comparación con la mutante K-12 MG1655 ryhB- . Más aún, la observación al microscopio de células filamentadas con septación incompleta apoyaría la idea de que ryhB es necesario para la división celular en E2348/69 y, posiblemente, dicho resultado coincida con la estructura lisa de las colonias E2348/69 ryhB- . Por otro lado, el impacto de la ausencia de ryhB también fue dispar en lo referente a la exposición a antibióticos y/o NaHCO3 entre las cepas E2348/69 ryhBy K-12 MG1655 ryhB- . La cepa K-12 MG1655 ryhB- , fue menos sensible a algunos antibióticos que la cepa E2348/69 mutante y la potencialización con NaHCO3 fue menor en la mutante MG1655 ryhB- , que en la cepa E2348/69 ryhB- . Todo esto apunta a una diferencia significativa en la importancia de ryhB en la cepa E2348/69 en comparación con la cepa K-12 MG1655.