Actividad trombolítica del extracto hidroalcohólico de Bougainvillea x buttiana (Var. Rosa) en modelo murino

La hemostasia es un suceso fisiológico que mantiene la sangre fluida en los vasos sanguíneos, pero ante una lesión vascular este mecanismo tiene la finalidad de crear un coagulo; una alteración en este proceso lleva a la formación de trombos. Y su formación está representado por la integridad de la triada de Virchow, lo cual conduce a graves complicaciones como infarto al miocardio, infarto cerebral, trombosis venosa y embolia pulmonar que implican una falta de circulación que en ocasiones conduce a la muerte, siendo así las Enfermedades Cardiovasculares (ECV), la principal causa de defunción a nivel mundial y tiene un registró del 21% de defunciones durante el 2018. Se estima que el tromboembolismo pulmonar corresponde el tercer lugar de morbimortalidad, luego de la enfermedad coronaria y trombosis cerebral, responsables del 5% de mortalidad global en la población de edad avanzada. A pesar de las diferentes alternativas quirúrgicas y tratamientos, éstos son de elevados costos, producen efectos adversos y generan tolerancia en las administraciones prolongadas. Y el empleo de plantas medicinales sigue siendo una alternativa para los pacientes, en este contexto, diversos estudios científicos han comprobado diferentes actividades farmacológicas relacionada con los extractos o compuestos presentes en la especie Bougainvillea x buttiana (Bxb) como actividad analgésica, antidiabética, antiinflamatoria, antioxidante y antihistamínica. En este sentido el presente trabajo evaluó la actividad trombolítica de B. x buttiana (Var. Rosa) a partir del extracto hidroalcohólico en un modelo murino, en el cual se realizó la determinación del efecto toxicológico agudo obteniendo que la administración de extracto hidroalcohólico de B. x buttiana (EHABxb) no causa toxicidad y se requiere dosis mayores a 2,000 mg/Kg de peso para inducir la letalidad. Posteriormente al ensayo toxicológico, se analizó el ensayo exploratorio a múltiples dosis del EHABxb mediante la vía oral e intraperitoneal y se evaluó en ratones CD1 en un modelo de trombosis generado por FeCl3, el EHABxb mostró que la dosis es dependiente en función del tiempo obteniendo que la DE50 se encuentra entre 50 mg/Kg vía intraperitoneal y 18 mg/Kg vía oral. Además, desde las 24 hasta las 72 horas el EHABxb mostro una disminución significativa de la actividad trombolítica comparado con el grupo control. El cual, a las 24 horas presentó el coagulo en el modelo murino que fue incrementando en función del tiempo. Posterior al ensayo trombolítico, se cuantificó el perfil de coagulación de cada grupo experimental al termino de 3 días de tratamiento, donde se presentó en el FeCl3 un incremento en los valores de fibrinógeno comparado con el EHABxb y no se mostró cambio de TP y TPT del EHABxb en via oral e intraperitoneal comparado con los valores basales y los de referencia; concluido lo anterior, se llevó a cabo el análisis de expresión de citocinas mostrando que el extracto promueve una mayor actividad antinflamatoria (IL-10) de acuerdo al balance de citocinas comparada con FeCl3, adicionalmente con la administración el EHABxb vía intraperitoneal en la expresión de IL-6 se obtuvo una diferencia significativa comparada con el FeCl3 y además, el extracto tuvo un comportamiento similar al de la aspirina y heparina utilizados como punto de referencia.

ABSTRACT Hemostasis is a physiological event that keeps blood flowing in blood vessels, but in the event of vascular injury this mechanism is intended to create a clot; an alteration in this process leads to thrombus formation. And its formation is represented by the integrity of Virchow's triad, which leads to serious complications such as myocardial infarction, cerebral infarction, venous thrombosis and pulmonary embolism involving a lack of circulation that sometimes leads to death, thus being cardiovascular diseases (CVD), the leading cause of death worldwide and has a record of 21% of deaths during 2018. It is estimated that pulmonary thromboembolism is the third leading cause of morbidity and mortality, after coronary heart disease and cerebral thrombosis, responsible for 5% of overall mortality in the elderly population. In spite of the different surgical alternatives and treatments, these are expensive, produce adverse effects and generate tolerance in prolonged administrations. And the use of medicinal plants remains an alternative for patients, in this context, several scientific studies have shown different pharmacological activities related to extracts or compounds present in the species Bougainvillea x buttiana (Bxb) as analgesic, antidiabetic, anti-inflammatory, antioxidant and antihistamine activity. In this sense, the present work evaluated the thrombolytic activity of B. x buttiana (Var. Rosa) from the hydroalcoholic extract in a murine model, in which the acute toxicological effect was determined, obtaining that the administration of hydroalcoholic extract of B. x buttiana (EHABxb) does not cause toxicity and doses higher than 2,000 mg/kg body weight are required to induce lethality. After the toxicological assay, the exploratory multi-dose assay of EHABxb was analyzed by oral and intraperitoneal routes and evaluated in CD1 mice in a model of thrombosis generated by FeCl3, EHABxb showed that the dose is time-dependent, obtaining that the DE50 is between 50 mg/kg intraperitoneal route and 18 mg/kg oral route. Furthermore, from 24 to 72 hours EHABxb showed a significant decrease in thrombolytic activity compared to the control group. At 24 hours, the coagulum in the murine model presented a clot that increased as a function of time. After the thrombolytic assay, the coagulation profile of each experimental group was quantified at the end of 3 days of treatment, where FeCl3 showed an increase in fibrinogen values compared to EHABxb and no change in TP and TPT of EHABxb in oral and intraperitoneal route compared to baseline and reference values; After this, the analysis of cytokine expression showed that the extract promoted a greater anti-inflammatory activity (IL-10) according to the cytokine balance compared to FeCl3; additionally, with the administration of EHABxb intraperitoneally in the expression of IL-6, a significant difference was obtained compared to FeCl3 and the extract had a behavior similar to that of aspirin and heparin used as a reference point.