Caracterización del efecto inmunomodulador de nitazoxanida en el proceso inflamatorio de pacientes con DM2

Antecedentes: La diabetes mellitus tipo 2 (DM2) es una afección inflamatoria de bajo grado con anomalías en la respuesta inmunitaria mediada por linfocitos T y macrófagos. El reposicionamiento de fármacos para moléculas inmunomoduladoras es una propuesta atractiva para el tratamiento de la DM2. La nitazoxanida (NTZ) es un fármaco de amplio espectro con efectos inmunomoduladores prometedores. Por lo tanto, investigamos el efecto inmunomodulador y antiinflamatorio de NTZen células mononucleares de sangre periférica (CMN) de pacientes con DM2. Materiales y métodos: Se seleccionaron 50 pacientes con DM2, y se evaluó la respuesta proliferativa de linfocitos T y la relación M1/M2 de macrófagos post cultivo celular por citometría de flujo, además de medir la concentración de citocinas por ELISA y la expresión relativa de microRNAs (miRNAs) relacionados con la respuesta inmune por PCR en tiempo real. Resultados: NTZejerce un efecto inhibitorio sobre la proliferación celular de linfocitos T estimulados con anticuerpos anti-CD3 y anti-CD28 sin modificar la viabilidad celular, y descensos significativos en las concentraciones sobrenadantes de interleucina (IL)-1β, IL-2, IL-6, IL-10 e IL-12. Además, NTZ regula negativamente la expresión relativa de miR-155-5p sin cambios en miR-146a-5p. La relación M1/M2 de monocitos/macrófagos disminuyó la subpoblación M1 y aumentó la subpoblación M2 por efecto de NTZ. Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que NTZejerce efectos inmunomoduladoresen CMN de pacientes con DM2, mostrando potenciales beneficios terapéuticos antiinflamatorios que podrían mejorar el estado de la enfermedad; estos hallazgos, junto con el amplío historial de seguridad del fármaco y la actual necesidad de tratamientos coadyuvantes, hacen relevante esta investigación para el futuro reposicionamiento farmacológico de NTZ. Abstract Background: Type 2 diabetes (T2D) is a low-grade inflammatory condition with abnormalities in the immune response mediated by T lymphocytes and macrophages. Drug repositioning for immunomodulatory molecules is an attractive proposal for treating T2D. Nitazoxanide (NTZ) is a broad-spectrum drug with promising immunomodulatory effects. Thus, we investigated the immunomodulatory and antiinflammatory effect of NTZ on peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients with T2D. Methods: Fifty patients with T2D were selected, and the proliferative response of T lymphocytes and the M1/M2 ratio of macrophages post cell culture were evaluated by flow cytometry, as well as measuring the concentration of cytokines by ELISA and the relative expression of microRNAs (miRNAs) related to the immune response by real-time PCR. Results: NTZexerts an inhibitory effect on the cell proliferation of T lymphocytes stimulated with anti-CD3 and anti-CD28 antibodies without modifying cell viability, and significant decreases in the supernatant concentrations of interleukin (IL)-1β, IL-2, IL-6, IL-10, and IL-12. Furthermore, NTZ negatively regulates the relative expression of miR-155-5p without changes in miR-146a-5p. The M1/M2 ratio of monocytes/macrophages decreased the M1 and increased the M2 subpopulation by NTZ. Conclusions: Our results suggest that NTZ exerts immunomodulatory effects on CMN of patients with DM2, showing potential anti-inflammatory therapeutic benefits that could improve the state of the disease; These investigations, together with the long history of safety of the drug and the current need for adjuvant treatments, make this investigation relevant for the future pharmacological repositioning of NTZ.