Transformación genética de ipomoea orizabensis e identificación de compuestos de resinas glicosídicas

RESUMEN Ipomoea orizabensis es una planta utilizada en la fitoterapia por la variedad de sustancias biológicamente importantes ligadas al componente químico presente en su resina. Las resinas glicosídicas son mezclas de glicolípidos de alto peso molecular generalmente extraídas de la raíz. La biotecnología ofrece técnicas como el cultivo de tejidos vegetales entre las que destacan técnicas de propagación y cultivos de raíces transformadas. Estos cultivos son una fuente potencial de compuestos farmacéuticos y una plataforma novedosa para su estudio. El presente proyecto evalúa el potencial del cultivo de raíces transformadas y de raíces in vitro de I. orizabensis para la producción de compuestos bioactivos identificados en las resinas glicosídicas aisladas de las raíces de esta planta en condiciones naturales. Se estableció como método de propagación la utilización de reguladores de crecimiento vegetal en concentraciones de 0.75 mg/L de BAP y 0.5mg/L de Kn, los cuales permitieron la inducción de brotes y crecimiento de raíz en I. orizabensis como lo ya reportado en I. batatas. En la transformación genética se determinó como cepa más eficiente a la A4 con 33.33% de eficiencia de transformación, sin embargo con la cepa ATCC1534/pTDT-RNAi se encontró un mejor fenotipo y una mayor capacidad de crecimiento de las raíces. Y se determinó que los oligosacáridos y polisacáridos son metabolitos especialmente abundantes en las raíces transformadas de I. orizabensis. En las plantas in vitro se identificaron glicolípidos en raíz principal, y compuestos aromáticos y glicolípidos de tipo jalapina en raíces laterales. En cultivo ex vitro se encontraron glicolípidos en formaciones tuberosas así como glicolípidos de tipo jalapina en raíz principal. Los análisis histológicos nos permitieron identificar en formaciones tuberosas y raíces obtenidas a partir de cultivo in viro y ex vitro de I. orizabensis la presencia de laticíferos, localizados en sitios de secreción de resinas por lo que estas células podrían estar relacionadas en la síntesis, almacenamiento o transporte de los glicolípidos.