Efecto de iones metálicos y radiación ultravioleta en el desplegamiento y agregación de gamma cristalinas humanas

ARLINE FERNANDEZ SILVA

Resumen. Las cataratas constituyen la primera causa de ceguera en el mundo. Esta patología se caracteriza por la opacidad parcial o total del lente ocular o cristalino. El cristalino es una estructura compuesta en su inmensa mayoría por proteínas. El 90% de estas proteínas son las cristalinas, que a su vez se dividen en dos familias las α-cristalinas que tienen función chaperona y las βγ-cristalinas que tienen función estructural. Las gamma S y D cristalinas se encuentran en elevadas concentraciones en el lente ocular y se han visto relacionadas con el desarrollo de las cataratas. Entre los factores de riesgo externos asociados a la aparición de cataratas, están la radiación UV y los iones metálicos. En este sentido existen informes en la literatura que muestran que el Cu(II) y el Zn(II) inducen la agregación de ambas proteínas y que este efecto es dependiente de la concentración del metal. De igual manera, otros trabajos han demostrado que la radiación UV favorece la agregación de la HγD cristalina. Sin embargo, en la mayoría de los trabajos publicados hasta el momento se emplean elevadas concentraciones de iones metálicos así como largos tiempos de exposición a la radiación. Tomando en consideración que la formación de las cataratas es un proceso lento, cinético, en el cual los daños que sufren las proteínas se van acumulando poco a poco, en este trabajo estudiamos el efecto de bajas concentraciones de Cu(II) y Zn(II) en el desplegamiento y agregación de ambas gamma cristalinas humanas. Además, en este trabajo estudiamos el efecto de la exposición a radiación UV por periodos cortos de tiempo sobre el desplegamiento y agregación de la HγS cristalina. En ambos casos, los experimentos se siguieron durante 12 horas y con el empleo de diferentes técnicas espectroscópicas, como la absorción de luz en la región visible y fluorescencia. Los resultados obtenidos muestran que si bien ambos metales inducen la agregación de ambas proteínas, los mecanismos de agregación muestran algunas diferencias. Por otro lado, encontramos que tiempos cortos de exposición a radiación UV inducen agregación de la HγS cristalina. Con la información proporcionada por las técnicas empleadas en este trabajo proponemos modelos de agregación para ambos factores estudiados.

Abstract Cataracts are the leading cause of blindness in the world. This disease produces partial or total opacity of the ocular lens due to proteins aggregation. The lens is composed mainly of proteins; and crystalins constitute more than 90% of the lens proteins. These are grouped in two families, the α-crystallins, with a chaperone function and the βγ-crystallines with structural function. The gamma S and D crystallins are the most abundant in the cortex and nucleus of the lens and have been related to the development of cataracts. Within the risk factors associated with developing cataracts, there are external factors such as UV radiation and metal ions. In this sense, it has been reported that Cu(II) and Zn(II) induce the aggregation of both proteins and this effect is dependent on the concentration of the metal. Similarly, other papers indicated that UV radiation favors the aggregation of HγD crystallin. However, in most of the works published so far, high concentrations of metal ions are used, as well as long time exposure to radiation. Taking account that cataracts formations is a slow, kinetic process, in which the damages suffered by proteins accumulate little by little, in this work we study the effect of low concentrations of Cu(II) and Zn(II) on unfolding and aggregation of both human gamma crystallin proteins. Furthermore, we study the effect of short UV radiation times on the unfolding and aggregation of human gamma S crystallins. In both cases, the experiments were followed for 12 hours and using different spectroscopic techniques such as visible light absorption and fluorescence. The results obtained show that although both metals induce the aggregation of both proteins, the pathways show differences. We find that short UV radiation exposure times induce HγS aggregation. With the information provided by the techniques used in this work, we propose aggregation models for both factors studied.

Tipo de documento: Tesis de doctorado

Formato: Adobe PDF

Audiencia: Investigadores

Idioma: Español

Área de conocimiento: INGENIERÍA Y TECNOLOGÍA

Campo disciplinar: CIENCIAS TECNOLÓGICAS

Nivel de acceso: Acceso Abierto