Desarrollo de bioensayos para evaluar citotoxicidad y estrés oxidativo participación de co-cultivos de células endoteliales y musculares lisas vasculares.

Los vasos sanguíneos se encargan de distribuir nutrientes y oxígeno, recoger dióxido de carbono y metabolitos de desecho del organismo. Las estructuras vasculares se encuentran recubiertas internamente de células endoteliales que segregan moléculas señalizadoras como algunos radicales libres, que modulan el crecimiento y proliferación celular, la activación de la expresión de citosinas, angiogénesis y regulan el tono vascular. Relevantemente, algunos procesos patológicos como diabetes y la obesidad generan disfunción endotelial debido a la citotoxicidad causada por la hiperglicemia o hiperlipidemia, respectivamente. De esta manera la ingeniería de vasos sanguíneos resulta de gran utilidad para obtener un modelo de evaluación que permita estudiar la interacción entre diversas poblaciones celulares en un ambiente más afín a la estructura natural..El objetivo de este proyecto fue generar un modelo para evaluar citotoxicidad y estrés oxidativo generado por poliuretanos, mediante cultivos de HUVECs, VSMC y co-cultivos, donde se caracterizó su perfil molecular y se realizó la evaluación de citotoxicidad y la generación de estrés oxidativo en presencia de membranas de poliuretanos. Las condiciones de cultivo permitieron propagar las HUVECs hasta el pase 10 utilizando el medio de cultivo UDMM-ENDO, obteniendo porcentajes de viabilidad por arriba del 80%, rendimientos máximos de 40000 cel/cm2, 0.7 a 2 doblajes de la población y un tiempo de replicación 27 a 55 h. La población mostró positividad del 80% para anti-Von Willenbrand, anti-Flk-1 y 90% para Ki67 al pase 8. Las células VSMC fueron cultivas hasta el pase número 8 en medio vascular ATCC y presentaron positividad del 100% para actina de musculo liso. Además, fue necesario generar un medio con mayor rentabilidad para la propagación de VSMCs este medio fue designado como UDMM-VSMC, mismo que fue utilizado para la evaluación de las membranas de poliuretanos en términos de citotoxicidad y generación de estrés oxidativo. Los bioensayos de citotoxicidad sobre los poliuretanos no mostraron alteración de las propiedades del cultivo de células HUVECs y VSMCs, así mismo, no se observó la generación de ROS en los cultivos cuando se incubaron con los polímeros por lo que se demuestra que los materiales analizados no generan citotoxicidad ni estrés oxidativo, por lo que se concluye que las membranas de poliuretanos evaluadas no muestran citotoxicidad y no generan estrés oxidativo, por lo que pueden ser utilizadas como andamiajes celulares.