Análisis de la expresión de la neurotoxina magi 4 utilizando diferentes medios de cultivo

Los venenos de arañas contienen un rico coctel de neurotoxinas y otros componentes biológicamente activos. Las atracotoxinas ACTX incluyendo a la neurotoxina Magi 4, son las únicas neurotoxinas que son letales para mamíferos e insectos. tienen un mecanismo de acción basado en la inactivación de los canales de Na+ dependientes de voltaje (Nav), estos Nav se encargan de regular el paso de los iones sodio a través de la membrana, abriéndose y cerrándose estimulados por un potencial de acción generando y propagando así señales eléctricas en células excitables. Así el estudio de estas toxinas nos ayudaría a comprender un poco más, la estructura y los mecanismos de acción de estas toxinas sobre los Nav. Sin embargo, una de las limitantes en el estudio de estas toxinas se centra en la poca disponibilidad y bajos rendimientos obtenidos, a partir de la extracción directa del veneno de dichas arañas, buscando una alternativa a esto y con base en el uso de la tecnología del ADN recombinante en E. coli, se han logrado expresar toxinas de arañas con que van desde los 0.7 a 20 mg/L, cabe destacar que las toxinas no siempre son activas. Algunos trabajos proponen resolver esto mediante el uso de diferentes cepas de E. coli, sistemas de producción o modificaciones en el medio de cultivo, que favorezcan la producción de toxinas solubles. Con el objetivo de generar toxinas recombinantes activas que pudieran sustituir los métodos tradicionales de obtención de estas. Es por esta razón que el presente trabajo pretende expresar de forma heteróloga la neurotoxina Magi 4 en diferentes cepas de E. coli partiendo de una construcción en el vector pQE-30 y la secuencia de la neurotoxina Magi 4 previamente diseñada, funcional y estable, para después realizar fermentaciones con diferentes medios de cultivo y sistemas buscando obtener las neurotoxinas de forma soluble y activa. Finalmente, las neurotoxinas obtenidas a partir de estas fermentaciones serán probadas en modelos de ratones y grillos para verificar si las neurotoxinas recombinantes poseen el mismo efecto farmacológico que las nativas.