Identificación de los complejos proteicos asociados a beta-catenina en linfocitos T CD8 de adultos y neonatos humanos

Resumen Los neonatos son una población en alto riesgo de contraer infecciones, que pueden dejar secuelas serias en su salud. Esto contrasta con la pobre información que se tiene sobre inmunidad neonatal, en particular en seres humanos. La respuesta inmune neonatal tiene características únicas que reflejan la transición del nacimiento y la adaptación del infante a su medio ambiente. En la vida intrauterina, tanto la madre como el feto deben evitar el rechazo aloinmune, mientras que después del nacimiento, el neonato va a enfrentar dos posibles tipos de antígenos: los que constituyen parte de un medio ambiente no nocivo al que se debe de adaptar y patógenos potenciales. Se debe permitir la colonización primaria por los microorganismos que constituirán la microbiota de piel y mucosas y a la vez contender con posibles organismos patogénicos, evitando el establecimiento de respuestas proinflamatorias, potencialmente nocivas. Parte de la protección del recién nacido es conferida por los anticuerpos maternos, pero no existe inmunidad celular pasiva durante el período neonatal, por lo que el recién nacido depende de su propio sistema inmunológico para enfrentar agentes patógenos intracelulares. En los neonatos, la inmunidad adaptativa se encuentra en un estado de tolerancia, determinado desde la etapa de gestación del feto. Los linfocitos T CD8+ neonatales se caracterizan por tener un alto umbral de activación y estar en un estado de quiescencia y auto-renovación. En consecuencia, los neonatos son individuos vulnerables a infecciones por patógenos intracelulares. Los mecanismos por los cuales se establecen estas características en los linfocitos y otras células del sistema inmune, aún no se conocen por completo. Sin embargo, la vía de señalización canónica de Wnt, dependiente de β-catenina, podría estar involucrada, ya que la vía es antagónica a la del receptor de células T. Se conoce que la vía canónica de Wnt participa en el desarrollo de los timocitos, pero también juega un papel fundamental en la biología de los linfocitos T. Esta vía posee la particularidad de regular dos procesos celulares antagónicos: auto-renovación y diferenciación. En ensayos epigenéticos del genoma de linfocitos T CD8+ vírgenes neonatales, se identificó en el laboratorio que la vía de Wnt se encuentra más activa en las Resumen VI células neonatales. En el presente trabajo, evaluamos por espectroscopía de masas los complejos proteicos que se asocian con β-catenina durante la activación de la vía canónica de Wnt. Encontramos que, aunque muchas proteínas de los complejos formados en las células T CD8+ de adultos y neonatos son compartidas, existe una serie de proteínas que sólo se encuentran en las células neonatales y otras que sólo se encuentran en las células de adultos. Estas proteínas diferencialmente reclutadas pueden establecer complejos que llevan a funciones biológicas distintas. En las células neonatales, complejos proteicos están asociados con ciclo celular, remodelación de la cromatina y metabolismo, mientras que en las células de adultos, los complejos proteicos participan en la regulación de la respuesta inmune y de MAP cinasas. También evaluamos el enriquecimiento de β-catenina sobre los promotores de genes de auto-renovación, señalización y diferenciación. Encontramos que la β-catenina está más enriquecida en los promotores de genes asociados con autorenovación en las células neonatales y con diferenciación en los genes de las células de adultos. Además, fue muy relevante encontrar que hubo una mayor asociación de β-catenina con P300 en las células de adultos al estimular con wnt3a a diferencia de las células de neonatos que obtuvo una mayor asociación por la proteína CBP. En conjunto, nuestro trabajo aportó nuevos conocimientos a la inmunobiología de los linfocitos T CD8 neonatales, que pueden contribuir al mejor manejo y comprensión de la población neonatal humana.