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Efecto de alteraciones en la secuencia de la E1B 55kDa sobre la exportación de mRNA virales y la degradación de sustratos de la Cullin5-E3 ubiquitina ligasa

dc.rights.licensehttp://creativecommons.org/licenses/by-nd/4.0 - Atribución-SinDerivadases_MX
dc.contributorRAMON ANTONIO GONZALEZ GARCIA CONDEes_MX
dc.contributor.authorBERTO TEJERA HERNANDEZes_MX
dc.contributor.otherdirector - Directores_MX
dc.coverage.spatialMEX - Méxicoes_MX
dc.date2019-03-10
dc.date.accessioned2019-04-02T15:58:53Z
dc.date.available2019-04-02T15:58:53Z
dc.identifier.urihttp://riaa.uaem.mx/handle/20.500.12055/641
dc.descriptionLa proteína adenoviral E1B 55kDa (E1B) es una proteína multifuncional que está involucrada en regular la producción de mRNA virales tardíos y en la inhibición de defensas celulares mediadas por p53 y Mre11. Esta proteína es modificada postraduccionalmente mediante SUMOilación y fosforilación. Estas modificaciones regulan las actividades de la E1B y están situadas hacia el amino (N) y carboxilo (C) terminal de la proteína, respectivamente. Esta proteína se localiza entre núcleo y citoplasma debido a la presencia de secuencias de importe (NLS) y exporte (NES) nuclear. El N y C terminal de E1B son intrínsecamente desordenados y algunos estudios de predicción de estructura tridimesional sugieren que la región central es un “core” hidrofóbico que podría ser importante para el plegamiento correcto de la proteína y para su interacción con proteínas y potencialmente ácidos nucleicos, debido a la presencia de un dominio putativo de ribonucleoproteína (RNP). Sin embargo el impacto de esta región sobre las actividades de la proteína no se conoce claramente. La E1B forma un complejo E3 ubiquitina ligasa junto con la proteína adenoviral E4orf6 que induce la poliubiquitinación y degradación de varios sustratos celulares que incluyen a p53 y Mre11. Además el complejo E1B-E4orf6 participa en la regulación del tráfico intranuclear de mRNAs virales tardíos así como en su estabilidad y splicing. Hasta el momento no se ha detectado la interacción de la E1B con RNA en el contexto de la infección y no se sabe cuál es su contribución en el ciclo replicativo de adenovirus. En este trabajo se construyeron adenovirus recombinantes con sustituciones de aminoácidos en el dominio putativo de RNP de la E1B con el objetivo de determinar de identificar su interacción con RNA y su impacto en el ciclo de replicación viral, específicamente, sobre la producción de progenie viral, la eficiencia de síntesis de proteínas tempranas y tardías, así como su contribución en la degradación de p53 y Mre11. Los resultados muestran que E1B interacciona con RNA en el contexto de la infección y que las sustituciones en el RNP afectan la producción de DNA y progenie viral, pero no la degradación de p53 y Mre11, ni la localización intranuclear de E1B. Por otra parte, se encontró una correlación entre la interacción de E1B con RNA y la producción y splicing de mRNAs virales tardíos, así como los tiempos en los que proteínas virales tempranas y tardías se sintetizan. Los resultados muestran que la interacción de E1B con RNA está implicada en la producción de los mRNA virales tardíos.es_MX
dc.descriptionThe early adenoviral E1B 55kDa (E1B) is a multifunctional protein involved in the regulation of viral late mRNAs expression and the inhibition of cellular defenses mediated by p53 and Mre11. This protein is modified post-translationally by SUMOylation and phosphorylation. These modifications regulate E1B activities and are located towards the N- and C-termini of the protein, respectively. This protein shuttles between the nucleus and cytoplasm due to the presence of a NES (Nuclear Export Signal) and a NLS (Nuclear Localization Signal). The N- and C-termini of E1B are intrinsically disordered and threedimensional structure prediction suggest that the central region could form a hydrophobic core that may be important for the proper folding of the protein and for its interaction with proteins and potentially nucleic acids, due to the presence of a putative ribonucleoprotein (RNP) domain. However, the impact of this region on the activities of the protein is not known. On the other hand, E1B assembles an E3 ubiquitin ligase complex together with the adenoviral protein E4orf6 inducing the polyubiquitination and degradation of several cellular substrates including p53 and Mre11. In addition, E1B participates in regulation of intranuclear trafficking of viral late mRNAs as well as their stability and splicing. So far, the interaction of E1B with RNA in the context of the infection has not been detected and its contribution to the adenovirus replication cycle is not known. In this work, recombinant adenoviruses with amino acid substitutions in the putative RNP motif were constructed to determine the possible interaction with RNA and its impact on the viral replication cycle,specifically, on the production of viral progeny, the efficiency of synthesis of early and late proteins and degradation of p53 and Mre11. The results showed that E1B interacts with RNA in the context of the infection and substitutions in the E1B RNP affect the accumulation of DNA and viral progeny production, but not the degradation of p53 and Mre11, nor the intranuclear localization of E1B. We found a correlation between the E1B-RNA interaction and the accumulation and splicing of viral late mRNAs, as well as the times in which early and late viral proteins are synthesized.es_MX
dc.formatpdf - Adobe PDFes_MX
dc.languagespa - Españoles_MX
dc.publisherEl autores_MX
dc.rightsopenAccess - Acceso Abiertoes_MX
dc.subject7 - INGENIERÍA Y TECNOLOGÍAes_MX
dc.subject.other33 - CIENCIAS TECNOLÓGICASes_MX
dc.titleEfecto de alteraciones en la secuencia de la E1B 55kDa sobre la exportación de mRNA virales y la degradación de sustratos de la Cullin5-E3 ubiquitina ligasaes_MX
dc.typedoctoralThesis - Tesis de doctoradoes_MX
uaem.unidadInstituto de Investigación en Ciencias Básicas y Aplicadas (IICBA) - Instituto de Investigación en Ciencias Básicas y Aplicadas (IICBA)es_MX
uaem.programaDoctorado en Ciencias - Doctorado en Cienciases_MX
dc.type.publicationacceptedVersiones_MX
dc.audienceresearchers - Investigadoreses_MX


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  • Colección Tesis Posgrado [1896]
    Se trata de tesis realizadas por estudiantes egresados de programas de posgrado de nuestra institución.

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