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Efecto de la proteína E4Orf1 de adenovirus 36 en la glucólisis y adipogénesis en células infectadas
| dc.rights.license | http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0 - Atribución-NoComercial | es_MX |
| dc.contributor | RAMON ANTONIO GONZALEZ GARCIA CONDE | es_MX |
| dc.contributor.author | VERONICA MERCEDES MARQUEZ VERGARA | es_MX |
| dc.contributor.other | director - Director | es_MX |
| dc.coverage.spatial | MEX - México | es_MX |
| dc.date | 2023-10-16 | |
| dc.date.accessioned | 2023-10-23T17:42:09Z | |
| dc.date.available | 2023-10-23T17:42:09Z | |
| dc.identifier.uri | http://riaa.uaem.mx/handle/20.500.12055/4177 | |
| dc.description | Los adenovirus son agentes infecciosos ubicuos que causan enfermedades respiratorias, gastroenteritis y queratoconjuntivitis. El adenovirus humano, especie D, tipo 36 (HAdV-D36) puede causar obesidad en modelos animales e induce la diferenciación de preadipocitos en cultivo celular, se ha asociado como un cofactor causal de obesidad en humanos. La infección por HAdV-D36 altera la expresión génica y el metabolismo de las células infectadas, resultando en una mayor captación de glucosa por el transportador de glucosa Glut4, la activación de la vía Ras/PI3K y la acumulación de triglicéridos por la regulación positiva de C/EBPs y PPARγ. Sin embargo, no se ha explorado la reprogramación metabólica de los preadipocitos en el contexto del ciclo de replicación viral, ni si los preadipocitos humanos pueden ser blanco de la infección in vivo. Hasta la fecha, la proteína adenoviral E4 open reading frame 1 (E4Orf1) se ha asociado con cada uno de los efectos descritos arriba. Sin embargo, los mecanismos adipogénicos alterados por la proteína E4Orf1 de HAdV-D36 se han evaluado en detalle en células transfectadas, y no se sabe si las mismas actividades pueden verse afectadas en el contexto de la infección viral. Los fibroblastos murinos 3T3-L1, que se han utilizado ampliamente como modelo de diferenciación de preadipocitos a adipocitos, se utilizaron en estos experimentos. En estas células, la infección por HAdV-D36 promueve la proliferación y la diferenciación hacia adipocito, pero la replicación viral es abortiva. Por lo tanto, durante el desarrollo del presente proyecto, inicialmente se establecieron las condiciones bajo las cuales las células 3T3-L1 son permisivas a la infección y encontrado que solo estando comprometidas para la diferenciación hacia adipocitos son permisivas y soportan la replicación viral productiva. Bajo estas condiciones, hemos evaluado el papel de la proteína E4Orf1 sobre la adipogénesis y replicación viral en células infectadas con HAdV-D36, comparando el efecto del virus HAdV-D36 Wt con el de un virus recombinante que no expresa la proteína E4Orf1 (HAdV-D36E4Orf1-). Los niveles de mRNAs virales y la replicación del DNA viral se midieron mediante RT-qPCR y qPCR, respectivamente, y la producción de progenie viral se determinó mediante ensayo en placa, en células infectadas con HAdV-D 36 Wt o HAdV-D364Orf1-. El efecto lipogénico de la proteína E4Orf1 se evaluó con tinción Oil Red O (ORO); y la expresión de genes que controlan el metabolismo de los lípidos se midió mediante RT-qPCR. Además, se hizo un análisis transcriptómico de células infectadas con HAdV-D36 Wt o HAdV-D364Orf1- mediante RNAseq, donde buscamos otras funciones asociadas a E4Orf1, siendo una de estas la activación de genes glucolíticos blancos de MYC que pudieran estar asociados al metabolismo alterado de la célula infectada. | es_MX |
| dc.format | pdf - Adobe PDF | es_MX |
| dc.language | spa - Español | es_MX |
| dc.publisher | El autor | es_MX |
| dc.rights | openAccess - Acceso Abierto | es_MX |
| dc.subject | 3 - MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD | es_MX |
| dc.subject.other | 32 - CIENCIAS MÉDICAS | es_MX |
| dc.title | Efecto de la proteína E4Orf1 de adenovirus 36 en la glucólisis y adipogénesis en células infectadas | es_MX |
| dc.type | doctoralThesis - Tesis de doctorado | es_MX |
| uaem.unidad | Centro de Investigación en Dinámica Celular (CIDC) - Instituto de Investigación en Ciencias Básicas y Aplicadas (IICBA) - Centro de Investigación en Dinámica Celular (CIDC) - Instituto de Investigación en Ciencias Básicas y Aplicadas (IICBA) | es_MX |
| uaem.programa | Doctorado en Ciencias - Doctorado en Ciencias | es_MX |
| dc.type.publication | acceptedVersion | es_MX |
| dc.audience | researchers - Investigadores | es_MX |
| dc.date.received | 2023-10-10 |
Ficheros en el recurso
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Se trata de tesis realizadas por estudiantes egresados de programas de posgrado de nuestra institución.