Análisis del desplegamiento de la 6aJL2 a pH 2.0 y 37°C

La amiloidosis de cadena ligera es una enfermedad mortal que consiste en la proliferación anormal de un clon de células plasmáticas monoclonales. Estas células secretan un exceso de cadenas ligeras de inmunoglobulinas al torrente sanguíneo, las cuales se depositan como fibras amiloides insolubles en órganos vitales y tejidos. La proteína 6aJL2 contiene los segmentos de la línea germinal λ6a y JL2, los cuales se han visto de manera frecuente presentes en proteínas de pacientes con amiloidosis de cadena ligera. Hay evidencia de que 6aJL2 in vitro, en un rango de pH (2.0 - 8.0) forma agregados fibrilares ordenados. Además, a pH 2.0 ocurren cambios conformacionales en la estructura terciaria. El objetivo de este estudio es caracterizar el proceso de desplegamiento de 6aJL2 a pH 2.0 y 37°C. Para ello se evaluó el efecto de estas condiciones en el desplegamiento por fluorescencia, DLS y RMN. La fluorescencia del triptófano arrojó una ligera variación en la intensidad con una posible agregación, mientras que el incremento en la del ANS indicó exposición de regiones hidrofóbicas. Según los resultados por DLS, la proteína inicialmente comienza como monómero y luego se encuentra como oligómero. En estos ensayos se encontró que el estado oligomérico inicial puede afectar la etapa que transite en el proceso de desplegamiento. Finalmente, en el análisis del desplegamiento de la proteína por RMN, se evidenciaron espectros correspondientes a fracciones plegadas y desplegadas.