Análisis proteómico-transcriptómico de carboxil-esterasas del trematodo parásito zoonotico Fasciola hepatica

El diagnóstico de la resistencia de los helmintos a los tratamientos antiparasitarios constituye un problema, por lo que se requiere un análisis entre organismos de una misma especie, para identificar aquellas variaciones genéticas y bioquímicas que los hacen resistentes. Esto ha llevado al diseño de bioensayos complicados que permitan identificar la resistencia de estos organismos a los diferentes químicos comerciales disponibles. Algunos de estos bioensayos se hacen in vitro con cepas de helmintos de referencia cultivados en laboratorio a la par de los helmintos que se desea diagnosticar, lo que hace que cada ensayo requiera de altos costos operativos y de un tiempo considerable para llevarse a cabo. Una alternativa al problema de diagnóstico de resistencia, son las técnicas moleculares y bioquímicas que han demostrado ser muy útiles en la detección de artrópodos resistentes a los pesticidas, y actualmente se utilizan en la identificación de cepas de artrópodos y helmintos resistentes a diferentes productos químicos. En este estudio se pretende diseñar un procedimiento para detectar a las carboxil- esterasas, enzimas que permiten metabolizar xenobióticos de F. hepatica, por medio de zimogramas y qPCR. Este procedimiento intentará detectar carboxilesterasas en cepas de parásitos cultivadas in vitro que muestren diferentes niveles de susceptibilidad y/o resistencia a los productos fasciolicidas comerciales y también permitirá diferenciar un complejo patrón de isozimas en diferentes etapas de desarrollo del trematodo. Los procedimientos desarrollados en este estudio permitirán identificar características fenotípicas, tales como la resistencia o susceptibilidad a los tratamientos fasciolicidas, algo necesario para implementar medidas de control, prevención y tratamiento de la fasciolasis.