Papel de las células t en la protección inducida por vp6 direccionado a langerina contra la infección por rotavirus en un modelo murino

RESUMEN Rotavirus (RV) es el principal agente etiológico de gastroenteritis en niños menores de 5 años. La proteína VP6 de RV constituye la capa intermedia del virión y conforma al virus en más del 50%. Su gran conservación entre las diferentes cepas de RV´s y su potencial para inducir respuestas inmunes protectoras, convierte a esta proteína en un excelente candidato para la promoción de una de una vacuna heterotípica de nueva generación. En estudios previos de nuestro laboratorio se demostró que ratones vacunados subcutáneamente con VP6 direccionado a DEC-205 presente en la membrana de las células dendríticas (CD´s) inducía una protección contra la infección intestinal por RV independiente de anticuerpos y dependiente de células T CD4+ y CD8+ . En el presente estudio se determinó si VP6 dirigido a otra lectina tipo C presente en la membrana de las CD´s, como Langerina, también podía inducir una respuesta inmune protectora a nivel intestinal contra RV. Se utilizaron dos tipos de vacunas; en una VP6 fusionado a Cohesina (VP6-Cohe) se conjugo a un anticuerpo monoclonal (Acm) AntiLangerina de ratón fusionado a Dockerina (Lang-Dock) (Anti-Lang-Dock-Cohe-VP6) y en la otra el Acm Anti-Langerina fue fusionado con la secuencia peptídica 289-302 de VP6 (Anti-Lang-V6289-302), que contiene un epítopo de células T CD4+ reconocido en el contexto de la molécula del MHC clase II (IEd ). Para cada tipo de vacuna, se aplicaron dos dosis separadas por 21 días en presencia de Poli I:C, y en el caso de la fusión Anti-Langerina-VP6 289-302 se aplicaron hasta 3 dosis. A los 21 días de la última dosis, los ratones se retaron con el RV murino EDIM. La vacunación con el conjugado Anti Lang-Dock-Cohe-VP6 resulto ser altamente inmunogénica y además brindó una protección de casi un 60% contra la infección por RV. Por el contrario, la fusión Anti-Lang-V6289-302 no indujo protección aún después de 3 dosis, por tal motivo todos los ensayos de células T se llevaron a partir de ratones vacunados con el conjugado Anti-Lang-Dock-Cohe-VP6. Cuando las células T CD4+ como CD8+ fueron eliminadas in vivo con Acm´s específicos en ratones vacunados antes del reto con RV, se encontró que ambas poblaciones eran determinantes en la protección. Se intentó corroborar este resultado transfiriendo células T de memoria específicas para VP6 a ratones naive retados con RV, sin embargo, por problemas técnicos no fue posible obtener resultados conclusivos. Los resultados de este trabajo nos indican que VP6 direccionada a Langerina presente en las CD´s es una alternativa para generar una respuesta inmune protectora a nivel intestinal con la infección por RV, y al igual que VP6 dirigido a DEC-205, las células T juegan un papel importante en esta protección. En estudios futuros sería importante determinar los mecanismos precisos por los cuales se induce esta respuesta.