Evaluación de tres hongos con potencial de biorremediación de gasolina magna en presencia de un polvo sorbente oleofílico

Resumen La gasolina es un compuesto que, debido a su baja solubilidad en agua y alta estabilidad ocasionada por los anillos aromáticos que la componen, persiste en los ecosistemas por largos periodos de tiempo. Componentes de la gasolina son mutagénicos y carcinogénicos, por lo que la búsqueda de métodos de remoción es de gran importancia. Es por esto que, se plantea la biorremediación, como una técnica de bajo impacto ambiental y alto rendimiento para tratar sitios contaminados con hidrocarburos. Así mismo, entre los organismos que se han utilizado para remover e incluso degradar estos componentes se destacan los hongos, los cuales se han caracterizado por su diversa capacidad metabólica, morfología robusta, rápida colonización, entre otras características, además de poseer altas actividades enzimáticas oxidativas e hidrolíticas. Por otro lado, se ha reportado que algunos hongos son capaces de utilizar co-sustratos como la lignina y la celulosa logrando una biorremediación más eficaz. En el laboratorio de Biología Molecular de Hongos del CEIB se aislaron tres hongos con un alto potencial biotecnológico: un hongo ascomiceto halófilo; Aspergillus sydowii-like con la capacidad de crecer usando benzo(a)pireno y fenantreno como únicas fuentes de carbono, Pycnoporus sanguineus, aislado de una zona contaminada con petróleo al sureste de México, esta cepa demostró tener una lacasa con un alto potencial para la degradación de hidrocarburos de alto peso molecular, y Trichoderma atroviride que sobreexpresa una lacasa heteróloga que degrada compuestos xenobióticos. Los tres hongos se crecieron en diferentes concentraciones de gasolina magna (1, 2.5, 5, 7.5, 10, 12.5 y 15%), los resultados demostraron que, las tasas de crecimiento en gasolina fueron mayores en comparación las tasas de crecimiento en medio de cultivo estándar (PDA), es decir, el micelio tuvo una cobertura mayor en el medio con gasolina que en el medio control; por otro lado el porcentaje de gasolina al cual ya no se detectó crecimiento fue 12.5% v/v para los tres hongos. Así mismo, el crecimiento en el sustrato ligninolítico se evaluó en dos concentraciones (1 y 2%), obteniendo los mejores resultados estadísticamente en 2% para los tres hongos, nuevamente las tasas de crecimiento fueron mayores en el sustrato ligninolítico en comparación con el control. Debido a estos resultados se decidió trabajar a una única concentración 8 de gasolina y sustrato ligninolítico, 10% y 2% respectivamente, con el hongo Trichoderma atroviride, que tuvo el crecimiento más eficiente estadísticamente en los experimentos en medio semi sólido. Consecutivamente, se realizaron los experimentos en medio líquido, utilizando una mezcla artificial de gasolina con los componentes más recalcitrantes del combustible: benceno, tolueno y xileno, para posteriormente comparar la remoción en tratamientos con y sin el sustrato lignocelulósico, mediante un análisis en HPLC, utilizando una fase móvil de metanol:agua. De igual forma del sobrenadante obtenido de los experimentos se cuantificó peso seco y actividad enzimática (lacasas y peroxidasas), donde únicamente el tratamiento que contenía al hongo y la mezcla de hidrocarburos resultó tener una remoción mayor en comparación del tratamiento que contenía el sustrato lignocelulósico, demostrando así la eficiencia de la cepa transgénica por si sola.