Caracterización espectroscópica de la interacción proteína-ligando: atLEA4-5 - iones metálicos, LAOBP - aminoácidos y CreCBD - ácidos nucleicos

RESUMEN El reconocimiento molecular (RM) en las interacciones proteínas-ligando, proteína-proteína o proteína-DNA gobierna la afinidad y la especificidad para la formación de estos complejos. El RM es el proceso mediante el cual macromoléculas biológicas interactúan con pequeñas moléculas a través de interacciones no covalentes. Está involucrado en procesos esenciales para la vida como la replicación, el metabolismo o la señalización. Los estudios de biología estructural no sólo tienen como objetivos ampliar los conocimientos documentados hasta el momento, sino también tienen una amplia aplicación, que va desde la terapéutica, mejora del diagnóstico molecular hasta la ingeniería de biosensores, entre otros. Comprender el RM en cuanto a las fuerzas físicas que subyacen a las interacciones proteínaligando tienen una gran relevancia científica y práctica. Esta tesis se basa en el uso de distintas técnicas espectroscópicas para caracterizar tres sistemas proteícos cuyos ligandos difieren en sus propiedades fisicoquímicas, AtLEA4-5 – iones metálicos; LAOBP – aminoácidos; CreCBD – ácidos nucleicos. Se emplearon las técnicas espectroscópicas de absorción electrónica en la región UV-vis, dicroísmo circular (DC) y resonancia magnética nuclear (RMN), así como la calorimetría de titulación isotérmica (ITC). En esta tesis se discuten los resultados obtenidos con cada metodología empleada con la finalidad de determinar aspectos relevantes como los residuos involucrados en la interacción o la termodinámica de la unión, así como las estrategias a seguir para completar la caracterización biofísica de la interacción proteína-ligando, todo lo cual pudiera contribuir al entendimiento del funcionamiento de estas proteínas.