Evaluación in vitro de péptidos para su potencial uso como inmunógenos contra anaplasma marginale

RESUMEN Anaplasma marginale es una bacteria Gram-negativa intraeritrocítica obligada del orden Rickettsiales, presenta una gran diversidad antigénica entre aislados geográficos, característica que se está estudiando por su importancia en el desarrollo de estrategias de control, cuya infección en bovinos causa anaplasmosis bovina, enfermedad infecciosa, no contagiosa que genera grandes pérdidas económicas en el ganado mexicano. En México no existe una vacuna comercial disponible. Se ha demostrado la importancia de IgG2 en la respuesta inmune contra la anaplasmosis bovina. El ganado protegido contra el desafío homólogo muestra una respuesta que implica la producción de IgG2 pero no de IgG1, por ende, la IgG2 presente en el suero de bovino protegido puede ser útil para identificar ligandos relevantes. Además, el uso de bibliotecas de péptidos al azar ha permitido la identificación de moléculas relevantes en la respuesta a un patógeno, aun cuando estén en bajas cantidades o incluso que estén presentes solo durante la infección. Por lo tanto, las inmunoglobulinas presentes en el suero de los animales pueden ser útiles para la identificación de ligandos importantes en la respuesta del huésped a la infección. Siendo el objetivo del presente trabajo, aislar y evaluar péptidos in vitro seleccionados por despliegue en fagos para su potencial uso como inmunógenos contra Anaplasma marginale. Utilizamos la biblioteca de péptidos aleatorios Ph.D. ™ -C7C del sistema de despliegue en fagos empleando recubrimiento directo con IgG2 purificada y sueros seleccionados de ganado bovino inmunizado contra A. marginale, generando una colección de fago-péptidos reconocidos y probados por ELISA. Seleccionamos algunos candidatos y se determinó su secuencia de ADN; Identificamos siete secuencias de péptidos deducidas de la composición de nucleótidos. Los fago-péptidos seleccionados se evaluaron mediante ELISA realizado con IgG2 purificada de tres sueros inmunes diferentes, sueros inmunizados y sueros con infección positiva. Diferenciamos tres fago-péptidos por sus propiedades de unión, especificidad, afinidad y estabilidad a los ligandos. Sin embargo, en el caso del desarrollo de vacunas o reactivos de diagnóstico, es importante evaluar las propiedades inmunogénicas y antigénicas de los péptidos.